尺寸排阻法的最大課題是分離條件的確立。廣泛普及的聚苯乙烯和中性糖的分離雖然可以使用公示的方法實(shí)施,但是分析各種樣品時(shí),很難得到重現(xiàn)性高的數(shù)據(jù)。
影響尺寸排阻色譜法分離的因素有以下幾點(diǎn):
1、離子性聚合物分析時(shí)由于離子鏈的伸縮,會(huì)對(duì)洗脫體積有影響。很難得到重現(xiàn)性號(hào)的譜圖時(shí),必須先考慮這個(gè)原因。請(qǐng)參考含離子性的親水性聚合物分析。
2、樣品分子內(nèi)部由于離子排阻而使分子鏈變大。
3、和填料產(chǎn)生離子排阻的情況。
尺寸排阻色譜柱是一款超高效液相尺寸排阻色譜柱,粒徑為2 um,由表面鍵合二醇基的硅膠顆粒充填,主要針對(duì)小分子蛋白、蛋白片段、多肽、寡核苷酸的分離分析而開發(fā)。
尺寸排阻色譜柱的保存:日常使用中,Sepax SEC色譜柱建議保存在150mM磷酸鹽緩沖液中(pH7.0)。如長(zhǎng)期不用時(shí),可將色譜柱保存至20%乙醇中,以防止菌體污染。(注:可根據(jù)具體使用條件選擇保存方式,如實(shí)驗(yàn)條件為緩沖鹽體系,建議保存在150mM磷酸鹽緩沖液中,pH 7.0。若實(shí)驗(yàn)條件為有機(jī)溶劑體系,建議保存在20%乙醇中。)